Asesoramiento sobre la expresión de anticuerpos recombinantes en bacteria y estudio de su reactividad por ensayos como ELISA y Western blot.

Servicio Tecnológico ST7503

 Detalle: El servicio está dirigido a prestar asesoramiento sobre la expresión, purificación y estudio de la reactividad de anticuerpos recombinantes específicos para un antígeno de interés. El acompañamiento en la elección del número de anticuerpos a expresar como proteína soluble en bacteria y su formato son procesos personalizados para cada solicitante.

 Metodología: Los anticuerpos recombinantes, como Fab, scFv y/o VHH, son comúnmente sub-clonados en un vector de expresión en fase con una señal de localización en periplasma para su expresión como proteína soluble en bacterias E. coli. A su vez, estos anticuerpos son también clonados en fase para su expresión con una etiqueta de 6xHIS para su posterior purificación por cromatografía de afinidad. Se asesora en diferentes protocolos de expresión y purificación para cada anticuerpo como en la puesta a punto de su expresión. Los anticuerpos se pueden expresar en diferentes formatos como bivalentes, bi-específicos, etc. Posteriormente, se confirma la reactividad específica de los anticuerpos purificados contra el antígeno de interés tanto por ELISA como SDS-PAGE/Western Blot. Se asesora sobre un conjunto de técnicas de inmunología y biología molecular, entre las que se destacan: Western Blot y SDS-PAGE, ELISA, clonado, PCR, expresión y purificación de proteínas, para generar anticuerpos específicos contra un blanco de interés. Se brindan informes del diagnostico inicial, en cada etapa y al final como soporte durante todo el proceso.

 Responsables: Dra. Vanina Grippo

@→ Mail de contacto: vgrippo@centromilstein.org.ar