Asesoramiento sobre la Tecnología de “Phage display”para la selección de anticuerpos o péptidos que reconozcan específicamente un blanco de interés.

Servicio Tecnológico ST7502

 Detalle: Asesoramiento sobre los protocolos de selección de anticuerpos recombinantes (Fab/scFv/VHH o Nanoanticuerpos) específicos contra un antígeno de interés por la metodología de Phage display. Tanto la puesta a punto como los protocolos de selección y el posterior screening de los clones seleccionados son procesos personalizados para cada solicitante.

 Metodología: Todo el proceso es personalizado para cada cliente según antígeno de interés y características deseadas de los anticuerpos recombinantes o péptidos que desea obtener. Se presta información y acompaña todo el proceso de selección a partir de bibliotecas de anticuerpos recombinantes o péptidos construidas en vectores fagemidos con el objetivo de obtener aquellos que reconozcan específicamente un antígeno (Ag) de interés por la metodología de Phage Display. El clonado de los genes codificantes para los anticuerpos o péptidos en marco con el gen de la proteína de cápside pIII/VIII del fago permite que se proceda al rastreo de las bibliotecas aprovechando que los fagos expresan en su superficie el anticuerpo recombinante o péptido. Se asesora en distintos protocolos de selección (en fase sólida y en solución); y distintos métodos de elución (pH acido, pH básico, etc). Posteriormente, se estudia la reactividad de los fagos obtenidos antes y después de las rondas de selección contra los Ags de interés por ELISA de fagos policlonales. Finalmente, se presta asesoramiento en la etapa final de “screening” de los fagos eluidos y reamplificados en bacteria. Para estudiar la diversidad de los clones seleccionados, se amplifican los genes codificantes de los VHH por PCR y el producto amplificado es digerido con una enzima de restricción de corte frecuente. Los clones que presenten una alta reactividad específica contra el Ag de interés en ELISA y un patrón de restricción enzimática diferente son posteriormente secuenciados. Se brindan informes del diagnostico inicial, en cada etapa y al final como soporte durante todo el proceso.

 Responsables: Dra. Vanina Grippo

@→ Mail de contacto: vgrippo@centromilstein.org.ar