Vacunas recombinantes y Producción de kits y reactivos de diagnóstico y monitoreo vacunal

Investigadora responsable: Thelma Verónica Poggio

Integrantes del grupo:

Lorena Analía Boado – Profesional Adjunto CONICET

Leticia Keller – Profesional Adjunto CONICET

José Manuel Gómez – Técnico Asistente CONICET

Juan Serafino – Becario Doctoral

Líneas de Trabajo

Los objetivos generales de nuestro laboratorio se focalizan en dos líneas principales de trabajo:

  1. El desarrollo de vacunas de nueva generación de administración sistémica o mucosal para uso en salud humana y sanidad animal y,
  2. Promoviendo el concepto multisectorial de “UNA SALUD” propuesto por OMS, trabajamos en el diseño, transferencia y producción a gran escala, de kits de diagnóstico serológico y monitoreo de anticuerpos vacunales, primordiales en los programas de vigilancia y control de enfermedades que impactan sobre la salud pública y la producción animal.

Hemos desarrollado diferentes estrategias de inmunización utilizando cepas atenuadas, vectores para la transferencia de genes inmunomoduladores, proteínas recombinantes y el uso de nanopartículas encapsuladoras de antígenos como plataforma de producción de vacunas. Evaluamos la inocuidad, seguridad y eficacia de las vacunas frente al desafío con el patógeno utilizando modelos de laboratorio y especies banco y estudiamos la respuesta inmune inducida en el huésped, mediante la caracterización de los mecanismos inmunes innatos y adaptativos.

Son ejemplo de esto, el desarrollo de vacunas recombinantes contra:

  • Boophilus microplus, garrapata del bovino,
  • Escherichia coli uropatogenica productora de cistitis, vacuna de administración intranasal,
  • Virus de la anemia infecciosa de salmones (ISAv) y Caligus rogercresseyi, parasito de salmónidos de importancia económica en acuicutura.
  • Echinococcus granulosus cestodo de causa Hidatidosis o Echinococcosis quística, zoonosis de mayor prevalencia en Argentina (5-10% en zonas endemicas).
  • Virus influenza A, vacuna de amplia protección basada en el dominio externo de la proteína Matrix 2 (eM2).

Las vacunas contra Caligus rogercresseyi y Echinococcus granulosus hoy son producto comercial con registro en Argentina, Chile, Peru, Paraguay, Mexico y Bolivia. En los animales de cría, la prevalencia de equinococosis quística que se observa en los mataderos de zonas hiperendémicas de América del Sur varía del 20% al 95% de los animales sacrificados.

Cabe destacar que la vacuna contra Echinococcus granulosus de administración en ovinos, caprinos bovinos y camelidos sudamericanos, se registró en el Organismo Oficial como primera vacuna recombinante de uso veterinario en programas de Control (Plan Nacional-MINAGRI 2012- y Programa de Prevención y Control de Hidatidosis/Equinococosis Quística- Chile -2016).

Para implementar las estrategias y procedimientos de prevención planteados por la norma técnica y manual de procedimientos para el control de la Echinococcosis quistica en la República Argentina y países limítrofes, no existe en el mercado disponibilidad de equipos para diagnostico serológico ni de monitoreo vacunal de hospederos. Nuestro laboratorio diseñó, desarrolló y validó ésta nueva tecnología bajo la Norma de Calidad ISO 9001-2008 reduciendo los riesgos y garantizando la mejora continua y la eficiencia de los procesos.

La producción de kits y reactivos de diagnóstico y monitoreo vacunal emplea la estación automatizada de pipeteo Biomek disponible en el Instituto y permite además el procesamiento rápido de un alto número de muestras aplicable a la realización de ensayos inmunológicos o moleculares a gran escala ofrecido como servicios (STAN) al sector público y privado.

Publicaciones del grupo:

  • Rivas-Aravena A, Fuentes Y, Cartagena J, Brito T, Poggio V, La Torre J, Mendoza H, Gonzalez-Nilo F, Sandino AM, Spencer E. Development of a nanoparticle-based oral vaccine for Atlantic salmon against ISAV using an alphavirus replicon as adjuvant. Fish Shellfish Immunol. 2015 Jul;45(1):157-66. doi: 10.1016/j.fsi.2015.03.033. Epub 2015 Apr 7.
  • Larrieu E, Poggio TV, Mujica G, Gauci CG, Labanchi JL, Herrero E, Araya D, Grizmado C, Calabro A, Talmon G, Crowley P, Santillán G, Vizcaychipi K, Seleiman M, Sepulveda L, Arezo M, Cachau MG, Lamberti R, Molina L, Gino L, Donadeu M, Lightowlers MW. Pilot field trial of the EG95 vaccine against ovine cystic echinococcosis in Rio Negro, Argentina: Humoral response to the vaccine. Parasitol Int. 2017 Jun;66(3):258-261. doi: 10.1016/j.parint. 2017.01.020. Epub 2017 Feb 4.
  • Poggio TV, Jensen O, Mossello M, Iriarte J, Avila HG, Gertiser ML, Serafino JJ, Romero S, Echenique MA, Dominguez DE, Barrios JR, Heath D. Serology and longevity of immunity against Echinococcus granulosus in sheep and llama induced by an oil-based EG95 vaccine. Parasite Immunol. 2016 Aug;38(8):496-502. doi: 10.1111/pim.12325. Epub 2016 Jun 13.
  • Larrieu E, Mujica G, Gauci CG, Vizcaychipi K, Seleiman M, Herrero E, Labanchi JL, Araya D, Sepúlveda L, Grizmado C, Calabro A, Talmon G, Poggio TV, Crowley P, Cespedes G, Santillán G, García Cachau M, Lamberti R, Gino L, Donadeu M, Lightowlers MW. Pilot Field Trial of the EG95 Vaccine Against Ovine Cystic Echinococcosis in Rio Negro, Argentina: Second Study of Impact. PLoS Negl Trop Dis. 2015 Oct 30;9(10):e0004134. doi: 10.1371/journal. pntd.0004134. eCollection 2015.
  • Ogas Castells ML, La Torre JL, Grigera PR, Poggio TV. A single dose of a suicidal DNA vaccine induces a specific immune response in salmonids. J Fish Dis. 2015 Jun;38(6):581-7. doi: 10.1111/jfd.12274. Epub 2014 Aug 8.
  • Poggio TV, La Torre JL, Scodeller EA. Intranasal immunization with a recombinant truncated FimH adhesin adjuvanted with CpG oligodeoxynucleotides protects mice against uropathogenic Escherichia coli challenge. Can J Microbiol. 2006 Nov;52(11):1093-102.
  • Cargnelutti DE, Sanchez MA, Alvarez P, Boado L, Mattion N, Scodeller EA. Enhancement of Th1 immune responses to recombinant influenza nucleoprotein by Ribi adjuvant.. New Microbiol. 2013 Apr;36(2):145-51. Epub 2013 Mar 31.
  • Alvarez P, Zylberman V, Ghersi G, Boado L, Palacios C, Goldbaum F, Mattion N. Tandem repeats of the extracellular domain of Matrix 2 influenza protein exposed in Brucella lumazine synthase decameric carrier molecule induce protection in mice. Vaccine. 2013 Jan 21;31(5):806-12. doi: 10.1016/j.vaccine.2012.11.072. Epub 2012 Dec 27.
  • Cargnelutti DE, Sanchez MV, Alvarez P, Boado L, Glikmann G, Mattion N, Scodeller EA.Improved immune response to recombinant influenza nucleoprotein formulated with ISCOMATRIX. J Microbiol Biotechnol. 2012 Mar;22(3):416-21.
  • Gallo Calderón M, Wilda M, Boado L, Keller L, Malirat V, Iglesias M, Mattion N, La Torre J.Study of canine parvovirus evolution: comparative analysis of full-length VP2 gene sequences from Argentina and international field strains. Virus Genes. 2012 Feb;44(1):32-9. doi: 10.1007/ s11262-011-0659-8. Epub 2011 Aug 20.
  • Alvarez P, Mattiello R, Rivailler P, Pereda A, Davis CT, Boado L, D’Ambrosio E, Aguirre S, Espinosa C, La Torre J, Donis R, Mattion N.First isolation of an H1N1 avian influenza virus from wild terrestrial non-migratory birds in Argentina. 2010 Jan 5;396(1):76-84. doi: 10.1016/ j.virol.2009.10.009. Epub 2009 Nov 6.
  • Romanutti C, Gallo Calderón M, Keller L, Mattion N, La Torre J. RT-PCR and sequence analysis of the full-length fusion protein of Canine Distemper Virus from domestic dogs. J Virol Methods. 2016 Feb;228:79-83. doi: 10.1016/j.jviromet.2015.11.011. Epub 2015 Nov 22.
  • Calderón MG1, Romanutti C, D’ Antuono A, Keller L, Mattion N, La Torre J. Evolution of canine parvovirus in Argentina between years 2003 and 2010: CPV2c has become the predominant variant affecting the domestic dog population. Virus Res. 2011 Apr;157(1):106-10. doi: 10.1016/j.virusres.2011.02.015. Epub 2011 Feb 24.

Premios

  • Premio Marian Smolinski, en el campo de la Epidemiologia, Vigilancia y Control, Mejor trabajo de investigación presentado en Categoría POSTER: Pilot field trial of the EG95 vaccine against ovine cystic echinococcosis in Rio Negro. Larrieu E, Poggio TV, Mujica G, Gauci CG, Labanchi JL, Herrero E, Araya D, Grizmado C, Calabro A, Talmon G, Crowley P, Santillán G, Vizcaychipi K, Seleiman M, Sepulveda L, Arezo M, Cachau MG, Lamberti R, Molina L, Gino L, Donadeu M, Lightowlers MWXXVI World Congress on Echinococcosis, Bucarest, Rumania, 1-3 octubre 2015
  • Mejor Poster categoría Diagnóstico: XL Jornadas Internacionales de Hidatidosis – XXXII Jornadas Nacionales de Hidatidosis, Diseño y producción de un kit de diagnóstico serológico de hidatidosis en hospederos intermediarios. Serafino J; Gallo Calderón M; Jensen O; Larrieu E; Poggio TV. Tandil, Pvcia de Buenos Aires, Argentina. 26-27 octubre 2017

Subsidios otorgados

EMPRETECNO 0057 Desarrollo de vacunas recombinantes preventivas para el control de Caligus rogercresseyi en salmones. Fonarsec-Tecnocax-CONICET. Responsable Técnico: Poggio TV

FONTAR NA 378/06 Desarrollo de nuevas vacunas mediante tecnología de ADN recombinante para la prevención la hidatidosis ovina y bovina. Tecnovax S.A. Responsable Técnico: Poggio TV

FONTAR ANR 300/05 Desarrollo de una vacuna recombinante contra garrapatas Boophilus microplus en bovinos. Responsable Técnico: Poggio TV

Préstamo PID-BID PICT 2011 CONICYT 2693 Uso de nanopartículas encapsuladoras de antígenos como plataforma de producción de vacunas en salmónidos Grupo Responsable: Poggio TV

Colaboraciones

Dr. Oscar Jensen: Centro de Investigación en Zoonosis, Ministerio de Salud y Ministerio de Desarrollo Territorial, Provincia de Chubut. Evaluación de la Vacuna recombinante EG95 contra Echinococcus granulosus. Evaluación de Kits de diagnóstico de Echinococcosis quística en ovinos y caprinos y monitoreo serológico de la vacuna EG95.

Dr. David Heath Ag Research de Nueva Zelanda. Desarrollo y Formulación de la Vacuna recombinante EG95 contra Echinococcus granulosus.

Dr. Edmundo Larrieu. Universidad Nacional de Rio Negro, Facultad de Veterinaria-CONICET. Evaluación de la Vacuna recombinante EG95 contra Echinococcus granulosus. Evaluación de Kits de diagnóstico de Echinococcosis quística en ovinos y caprinos y monitoreo serológico de la vacuna EG95.

Dra. Viviana Orcellet. Cátedra de Parasitología y Enfermedades Parasitarias de la Facultad de Ciencias Veterinarias de Esperanza, Santa Fe. Evaluación de prevalencia de Echinococcosis quística en ovinos y caprinos.

Servicio Agrícola Ganadero SAG -Chile Región Alto Bio Bio Programa de Control de la hidatidosis mediante la vacunación en ovinos. Detección de anticuerpos vacunales

Dr Rafael Tamayo.  Universidad Austral de Chile. Facultad de Ciencias Veterinarias, Valdivia, Chile. Experiencia de control de hidatidosis en Isla del Rey-Comuna de Corral-Región de los Ríos